凱氏定氮儀作為測定蛋白質的儀器,廣泛應用于乳與乳制品中蛋白質的含量的測定。具有高靈敏度,分析速度快,應用范圍廣,所需試樣少,設備和操作比較簡單等特點,它是目前使用較廣泛測定乳與乳制品中蛋白質的儀器。
飼料中的粗蛋白質的測定是飼料品質鑒定的重要檢測項目,所以在畜牧生產實踐中不管是對單一飼料、全價飼料還是濃縮飼料,都須測定粗蛋白質的含量。測定飼料粗蛋白質的工作是一項飼料行業(yè)須做的工作,并且在測定方法上也要力求經濟、易行、準確等原則。
目前測定飼料中粗蛋白質含量的方法有很多,常用的方法有、考馬斯亮藍法、強堿直接蒸餾法、雙縮脲法、紫外吸收法、凱氏定氮法。目前,凱氏定氮法是測定糧食、飼料以及食品等蛋白質含量的國家標準方法。本次實驗的目的是應用凱氏定氮儀將四種飼料樣品消化2h后不同的蒸餾時間內進行蛋白質含量的測定,得出測定粗蛋白的蒸餾時間,對以后測定粗蛋白提供依據。
實驗方法:
采用凱氏定氮法。原理是飼料樣本與強酸和相應的催化劑一起加熱消化,使蛋白質分解,產生的氨(NH3)形成硫酸銨。然后用強堿進行蒸餾,使氨氣游離出來,再由硼酸吸收后以鹽酸標準溶液滴定,根據鹽酸的消耗量換算成粗蛋白質含量。
其實驗原理是:
蛋白質是一種含氮的有機化合物,樣品中的蛋白質經硫酸和催化劑合成后,發(fā)作的氨可以與硫酸聯絡,生成硫酸氨,再經過堿化蒸餾后,氨即成為游離情況,游離氨經硼酸吸收,再以硫酸或鹽酸的規(guī)范溶液停止滴定,依據酸的耗費量再乘以換算系數,就可以推算出樣品中的蛋白含量。