如何測(cè)定青稞秸桿中蛋白質(zhì)含量

　　我國年產(chǎn)秸桿達(dá)5億噸，其中除少部分秸桿用作牛羊等反芻動(dòng)物飼料或還田作肥料外大部分秸桿被焚燒、廢棄既造成了資源的巨大浪費(fèi)也對(duì)環(huán)境產(chǎn)生污染。青稞（HordeumVulgerL.var.nudumHook.f）在植物分類學(xué)上屬于禾本科小麥族大麥屬于大麥變種之一，在其他產(chǎn)區(qū)也稱米大麥、米麥、裸麥。主要分布在我國西藏、四川、云南、甘肅、青海等地。青稞秸桿中含有許多有營養(yǎng)物質(zhì)如：氨基酸、微量元素、β—葡聚糖等，是自然界存在的巨大的可再生資源，為充分利用這一營養(yǎng)的可再生資源，本文對(duì)其秸桿中蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成生物體細(xì)胞的重要成分，是生物體發(fā)育及修補(bǔ)的原料，一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質(zhì)。人及動(dòng)物只能從食品得到蛋白質(zhì)及其分解產(chǎn)物，來構(gòu)成自身的蛋白質(zhì)，故蛋白質(zhì)是人體及動(dòng)物重要的營養(yǎng)物質(zhì)，也是食品中重要的營養(yǎng)指標(biāo)。其具有糖類和脂肪不可代替的作用，是動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所必要的營養(yǎng)元素之一,是氨基酸以肽鍵相結(jié)合形成的、極其復(fù)雜的高分子化合物，是生物體主要的含氮物質(zhì)。飼料是否合格，粗蛋白含量多少是一項(xiàng)重要指標(biāo)。下面就用飼料中粗蛋白含量的常規(guī)方法—凱氏氮法測(cè)定其蛋白質(zhì)的含量。

　　儀器及試劑：儀器為藥物粉碎機(jī)、分析天平、凱氏定氮儀（包括凱氏定氮蒸餾裝置和消化爐）、凱氏燒瓶。試劑為濃硫酸（AR級(jí)）；50%氫氧化鈉溶液；硫酸鉀；硫酸銅；0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑。本文我們采用GB/T5009.5—2003標(biāo)準(zhǔn)法來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。

　　實(shí)驗(yàn)過程：將成熟后的枯黃的莖稈粉碎過篩后備用。去試樣0.500～2.000g準(zhǔn)確至0.0002g，放入凱氏燒杯中，加入10g無水硫酸鉀0.5g硫酸銅和20ml濃硫酸。和2粒玻璃珠，將凱氏燒杯置于電爐上加熱，開始小火，代樣品焦化，泡沫消失后，再火力直至呈透明的藍(lán)綠色，然后再繼續(xù)加熱，約2h；去出凱氏燒瓶加入約200ml蒸餾水，連接定氮蒸餾裝置，將餾出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含數(shù)滴甲基紅的01.mol/L標(biāo)液的三角燒瓶中，在凱氏燒瓶?jī)?nèi)加入少許沸石緩緩加入80ml50%氫氧化鈉溶液，立即連接好定氮球，檢查整個(gè)定氮裝置是否漏氣，用直接火源加熱蒸餾，蒸餾至凱氏燒瓶?jī)?nèi)殘?jiān)种粫r(shí)，打開定氮球與凱氏燒瓶的塞口，停止加熱；1）用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定，移取樣品至錐形瓶中用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定，直至標(biāo)準(zhǔn)溶液由藍(lán)綠色變成灰紅色為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V2；2）空白實(shí)驗(yàn)取與消化樣品時(shí)同樣的量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸，按上述方法進(jìn)行消化、定容到100ml，的空白消化液，取同量空白消化液進(jìn)行蒸餾，用指示劑滴定至紅色消失為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V1。

　　結(jié)果計(jì)算：總氮量（%）=C*（V2-V1）÷1000×14.1/w；注C-鹽酸的摩爾溶液；V1-空白滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)液的量（ml）；V2-樣品滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)酸液的量（ml）；w-樣品的質(zhì)量；14.1-氮的摩爾質(zhì)量。蛋白質(zhì)（%）=總氮量%*K；K-氨轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的系數(shù)取5.7。

　　結(jié)論：從我們的的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這批青稞秸稈蛋白質(zhì)含量較低，平均為1.482，與作為飼料時(shí)蛋白質(zhì)含量在2-8%之間還有一定的差距。因此直接將青稞秸稈作為飼料是不合理的，因?yàn)槠涞鞍踪|(zhì)含量低、質(zhì)地粗硬，適口性差且不易消化和吸收，但是秸稈中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所積累的一半能量，且分布廣泛，競(jìng)爭(zhēng)性用途少，開發(fā)利用潛力很大。